Компания Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. является одним из самых опытных производителей и поставщиков пептида 3xflag cas 402750-12-3 в Китае. Добро пожаловать на оптовую оптовую продажу высококачественного пептида 3xflag cas 402750-12-3, который продается на нашем заводе. Доступны хороший сервис и разумные цены.
3XFLAG Пептидпредставляет собой важную пептидную маркерную последовательность, широко используемую в процессах экспрессии и очистки белков в биомедицинских исследованиях. Молекулярная формула C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Его последовательность, состоящая из 23 аминокислот, содержит три повторяющихся мотива Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp, которые придают ему специфические структурные особенности.
Имеет хорошую растворимость в специфических растворителях. Например, в ДМСО его растворимость высока, что делает его удобным для проведения операций и экспериментов в растворе. Кроме того, он также может достичь хорошего эффекта растворения в воде за счет мягкого нагрева. Он также имеет некоторые особые свойства. Например, он обладает хорошей антигенностью и реактивностью и может связываться со специфическими антителами против FLAG. Эта связывающая способность делает его широко применимым в таких экспериментах, как иммунопреципитация. Путем конкурентного связывания с антителами против FLAG экспрессируемый слитый белок FLAG, который связывается с антителами против FLAG, может быть элюирован во время иммунопреципитации, тем самым достигая локализации, обнаружения и очистки целевого белка.
|
Индивидуальные крышки и пробки для бутылок:
|
|


|
Химическая формула |
C120H169N31O49S |
|
Точная масса |
2860 |
|
Молекулярный вес |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Элементный анализ |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |

3XFLAG Пептид— это метка, используемая в исследованиях белков, состоящая из 8 аминокислот с последовательностью DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Его основная функция — служить маркером экспрессии и очистки белков, обеспечивая удобное и эффективное средство исследований.

1. Аффинная очистка:
Его можно использовать в качестве метки для очистки белков, а благодаря его высокому сродству с антителами против FLAG целевой белок можно легко очистить. Обычно целевой белок совместно трансфицируют в клетки с вектором экспрессии, содержащим 3X FLAG PEPTIDE, а затем очищают аффинным способом с использованием антител против FLAG для быстрого и эффективного получения целевого белка высокой чистоты.
2. Иммунологическое тестирование:
Благодаря высокой иммуногенности его можно использовать для выявления экспрессии и локализации белков. Используя специфические антитела против FLAG, можно использовать экспериментальные методы, такие как иммуноблоттинг и иммунофлуоресцентное окрашивание, для быстрого и точного определения уровня экспрессии и распределения целевых белков.

3. Фильтрация клонов:
Его также можно использовать для удобства скрининга клонов белков. В процессе конструирования векторов экспрессии белков соединение последовательности гена целевого белка с последовательностью 3XFLAG может облегчить скрининг положительных клонов с целевым белком посредством иммунного обнаружения и других методов, тем самым ускоряя процесс исследования функции белка.
4. Иммунопреципитация:
Его также можно использовать для экспериментов по иммунопреципитации белков. Связывая белки, содержащие метки 3X FLAG PEPTIDE, с антителами против FLAG, а затем используя адсорбционные материалы, такие как агароза белка A/G или магнитные шарики, целевой белок и его взаимодействующие партнеры можно выборочно осаждать из клеточных экстрактов для изучения сети взаимодействия белков.


5. Проверка на наркотики:
Его также можно использовать в исследованиях по скринингу наркотиков. Комбинируя метку 3X FLAG PEPTIDE с интересующим белком, можно добиться высокопроизводительного скрининга белка. Этот метод скрининга можно использовать для обнаружения новых мишеней для лекарств, оценки взаимодействия лекарств с белками и так далее.
6. Исследование функции белка:
Введение меток существенно не влияет на природную структуру и функции белков и поэтому может быть использовано для изучения биологических функций, субклеточной локализации, взаимодействий и передачи сигналов белков. Внедряя метку 3X FLAG PEPTIDE, можно проводить углубленные исследования биологических характеристик белков, что помогает раскрыть механизмы их действия в клеточной биологии и физиологии.


3XFLAG Пептидпредставляет собой пептид, содержащий 8 аминокислот с последовательностью DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Его обычно используют в качестве белковой метки для удобной очистки, обнаружения и исследования целевых белков. В процессе биосинтеза его можно получить методами химического синтеза или генной инженерии. Ниже приведены подробные этапы методов генной инженерии:
1. Спроектировать и синтезировать гены:
Во-первых, необходимо сконструировать искусственный ген, содержащий последовательность ПЕПТИДА 3X FLAG. Этот ген должен содержать последовательность 3X FLAG PEPTIDE, а также соответствующие промоторы, терминаторы и маркеры селекции (такие как гены толерантности к антибиотикам). При проектировании генов следует учитывать характеристики и потребности экспрессии целевого хозяина.
2. Клонирование генов:
Затем созданные искусственные гены будут клонированы в соответствующие векторы экспрессии. Обычно используемые векторы включают плазмиды, вирусные векторы и т. д. Процесс клонирования обычно включает следующие этапы:
-ПЦР-амплификация: использование полимеразной цепной реакции (ПЦР) для амплификации целевой последовательности гена из матричной ДНК.
-Переваривание и соединение. Продукты ПЦР расщепляются векторами экспрессии с использованием эндонуклеаз рестрикции, а затем соединяются вместе с помощью ДНК-лигаз.
-Трансформация: трансформация связанного вектора экспрессии в бактерии-хозяева, такие как Escherichia coli, с образованием рекомбинантной плазмиды.
-Идентификация: рекомбинантные плазмиды были идентифицированы с помощью ПЦР, ферментативного расщепления, секвенирования ДНК и других методов для подтверждения того, что целевой ген был успешно клонирован в вектор.
3. Целевой белок экспрессии:
Трансфицируйте сконструированный вектор экспрессии в клетки-мишени-хозяева, такие как клетки млекопитающих, дрожжевые клетки, клетки насекомых и т. д. Внутри клеток вектор экспрессии транскрибируется в мРНК, а затем транслируется в белки. . 3ПЕПТИД X-FLAG будет экспрессироваться вместе с целевым белком в качестве белковой метки.
4. Экстракция белка:
Соберите трансфицированные клетки и выполните фрагментацию клеток, центрифугирование и другие процедуры для получения общего экстракта белка.
5. Очищенный белок:
Используя методы аффинной очистки, такие как иммунопреципитация и аффинная хроматография, целевые белки, содержащие метки 3X FLAG PEPTIDE, были очищены из общего экстракта. Обычно это включает связывание антител против FLAG с белками, содержащими 3X FLAG PEPTIDE, а затем их разделение с использованием колонок для аффинной хроматографии или магнитных шариков.
6. Определить белки:
Очищенный белок был идентифицирован и количественно определен с помощью гель-электрофореза в ДСН-ПААГ, иммуноблоттинга, масс-спектрометрии и других технологий для обеспечения его чистоты и целостности.
Побочные реакции
В биомедицинских исследованиях и экспериментах, связанных с белками, пептиды-метки играют решающую роль. Они могут помочь исследователям в очистке, обнаружении и обнаружении целевых белков, что в значительной степени способствует развитию науки о белках.3XFLAG Пептидявляется распространенным и широко используемым пептидом-меткой, состоящим из трех повторяющихся последовательностей метки FLAG. Тег FLAG был первоначально разработан Хоппом и др. в 1988 году, а позже превратились в такие варианты, как 3XFLAG, которые обладают высокой аффинностью и специфичностью и могут связываться со специфическими антителами, облегчая последующее выделение и идентификацию. Хотя 3XFLAG принес много удобств в экспериментах, как и другие биологические агенты, он также может вызывать некоторые побочные реакции.
Побочные реакции со стороны иммунной системы
Иммуногенность
Иммуногенность означает способность вещества стимулировать иммунную систему организма, вызывая иммунный ответ.. 3XFLAG, как экзогенный пептидный сегмент, может распознаваться иммунной системой организма как «чужой» компонент, вызывая тем самым иммунный ответ. Хотя последовательность 3XFLAG относительно короткая, в некоторых случаях она все же может активировать В- и Т-клетки, что приводит к выработке антител. Эти антитела не только связываются со свободным 3XFLAG, но также могут распознавать и связываться со слитыми белками, экспрессирующими метку 3XFLAG, влияя на нормальную функцию и распределение слитого белка.
Аллергические реакции
Аллергическая реакция – это аномальный иммунный ответ, вызванный чрезмерной чувствительностью иммунной системы к определенным аллергенам. У отдельных людей могут возникнуть аллергические реакции при использовании 3XFLAG для экспериментов или лечения. Выраженность симптомов аллергических реакций варьируется. Легкие случаи могут проявляться местными симптомами, такими как зуд, сыпь и эритема, тогда как тяжелые случаи могут вызывать системные аллергические реакции, такие как анафилактический шок, характеризующийся резким падением артериального давления, затруднением дыхания и потерей сознания, что представляет серьезную угрозу безопасности жизни.
Аллергические реакции
Механизм аллергических реакций в основном связан с антителами IgE в иммунной системе. Когда организм впервые контактирует с 3XFLAG, иммунная система распознает его как аллерген и стимулирует В-клетки вырабатывать специфические антитела IgE. Эти антитела IgE прикрепляются к поверхности тучных клеток и эозинофилов. Когда организм снова вступает в контакт с 3XFLAG, он связывается с антителами IgE на поверхности клеток, заставляя тучные клетки и эозинофилы высвобождать биоактивные медиаторы, такие как гистамин и лейкотриены, что приводит к возникновению аллергических симптомов.
Риск аутоиммунных заболеваний
Длительное или неоднократное воздействие 3XFLAG может увеличить риск развития аутоиммунных заболеваний. Аутоиммунные заболевания — это тип заболевания, при котором иммунная система организма по ошибке атакует собственные ткани и органы, что приводит к повреждению тканей и функциональным нарушениям.. 3XFLAG может побуждать иммунную систему вырабатывать перекрестно реагирующие антитела и Т-клетки с помощью механизма молекулярного моделирования, где его аминокислотная последовательность аналогична последовательности некоторых белков в самом организме.

Эти иммунные клетки и антитела не только атакуют чужеродный 3XFLAG, но и непреднамеренно повреждают нормальные ткани организма, что приводит к аутоиммунным заболеваниям. Например, некоторые аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка и ревматоидный артрит, могут быть связаны с аутоиммунными реакциями, вызванными экзогенными веществами. Хотя в настоящее время нет четких доказательств того, что 3XFLAG напрямую вызывает аутоиммунные заболевания, этот потенциальный риск нельзя игнорировать.
Влияние на клеточную функцию
В некоторых экспериментальных исследованиях было обнаружено, что высокие концентрации 3XFLAG могут оказывать токсическое воздействие на клетки. Проявления цитотоксичности включают изменения морфологии клеток, нарушение целостности клеточных мембран, изменения активности внутриклеточных ферментов и ингибирование пролиферации клеток. Механизм его действия может быть связан с взаимодействием 3XFLAG с клеточной мембраной. Из-за сильного отрицательного заряда 3XFLAG,

он может связываться с положительно заряженными компонентами клеточной мембраны посредством электростатических взаимодействий, изменяя проницаемость и текучесть клеточной мембраны, что приводит к утечке внутриклеточных веществ или проникновению вредных веществ извне, тем самым влияя на нормальные физиологические функции клетки. Кроме того, 3XFLAG также может проникать внутрь клеток, вмешиваться в сигнальные пути, синтез белка и другие процессы, еще больше усугубляя повреждение клеток.
Влияние на клеточные сигнальные пути
3XFLAG может влиять на внутриклеточные сигнальные пути и влиять на нормальную физиологическую активность клеток. Клеточный сигнальный путь — это собирательный термин для серии молекулярных событий, в которых клетки реагируют на внешние раздражители, регулируя важные процессы, такие как рост клеток, дифференцировка и апоптоз.. 3XFLAG может мешать нормальной передаче сигнальных путей, взаимодействуя с ключевыми молекулами сигнального пути, изменяя активность или уровни экспрессии сигнальных молекул.


Например, он может связываться с рецепторами на поверхности клетки, конкурентно ингибируя связывание природных лигандов с рецепторами и блокируя передачу сигнала; Альтернативно, он может проникать в клетку и связываться с белками сигнальной трансдукции, влияя на фосфорилирование, дефосфорилирование и другие процессы модификации белков, мешая передаче и амплификации сигналов. Такое вмешательство в клеточные сигнальные пути может привести к клеточной дисфункции, влияя на такие процессы, как пролиферация, дифференцировка и апоптоз клеток, что, в свою очередь, может оказывать неблагоприятное воздействие на нормальное развитие и функцию тканей и органов.
Влияние на клеточный метаболизм
Клеточный метаболизм – это общий термин, обозначающий серию химических реакций, происходящих внутри клеток, обеспечивающих энергетическую и материальную основу для жизнедеятельности клеток.. 3XFLAG может влиять на клеточные метаболические процессы, мешать выработке клеточной энергии и синтезу веществ. Например, он может влиять на функцию митохондрий, которые являются основными местами аэробного дыхания и производства энергии в клетках.. 3XFLAG может изменять проницаемость и потенциал митохондриальной мембраны, взаимодействуя с белками или липидами на мембране, влияя на функцию дыхательной цепи митохондрий и синтез АТФ.

что приводит к недостаточному снабжению клеток энергией. Кроме того,3XFLAG Пептидтакже может вмешиваться во внутриклеточные процессы, такие как метаболизм глюкозы и метаболизм липидов, влияя на баланс синтеза и разложения веществ в клетках и оказывая негативное влияние на нормальные физиологические функции клеток.
Часто задаваемые вопросы
Что такое 3X ФЛАГ?
+
-
Пептид 3X FLAG представляет собой синтетический пептид из 23 аминокислотных остатков. Мотив Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp повторяется в пептиде трижды. Восемь аминокислот на С-конце составляют классическую последовательность FLAG (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
В чем разница между flag-tag и 3xflag?
+
-
Флаг-тег представляет собой одну последовательность из 8 аминокислот, обычно используемую в методах иммунопреципитации, вестерн-блоттинга и иммунофлуоресценции. Напротив, 3x Flag-tag содержит 22 аминокислоты, что придает ему большее сродство к антителам против-Flag и делает его особенно выгодным для рабочих процессов очистки белков.
Как распустить 3X FLAG?
+
-
Чтобы приготовить исходный раствор, растворите его в TBS (50 мМ трис-HCl, pH 7,4, с 150 мМ NaCl) в концентрации 5 мг/мл. Аликвоту и хранить при –20 градусах. Повторное замораживание и оттаивание не рекомендуется.
горячая этикетка : 3xflag пептид cas 402750-12-3, поставщики, производители, завод, опт, купить, цена, оптом, продажа




