Компания Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. является одним из самых опытных производителей и поставщиков гидрата нингидрина cas 485-47-2 в Китае. Добро пожаловать на оптовую продажу высококачественного гидрата нингидрина cas 485-47-2 оптом, который продается на нашем заводе. Доступны хороший сервис и разумные цены.
Нингидрин гидратпредставляет собой органическое соединение с молекулярной формулой C9H6O4, CAS 485-47-2 и молекулярной массой 178,141. Это почти белый кристаллический или светло-желтый кристаллический порошок, слегка растворимый в эфире и хлороформе, который становится красным при температуре выше 100 градусов. Легко растворим в воде, растворим в этаноле, мало растворим в эфире и хлороформе. Может использоваться в качестве колориметрического зонда для количественного анализа аминокислот и белков. Может использоваться для мониторинга снятия защиты при твердофазном синтезе пептидов (тест Кайзера). Пептидная цепь соединена с твердой матрицей через С-конец, а N-конец используется для расширения пептидной цепи.
|
Химическая формула |
C9H6O4 |
|
Точная масса |
178 |
|
Молекулярный вес |
178 |
|
m/z |
178 (100.0%), 179 (9.7%) |
|
Элементный анализ |
C, 60.68; H, 3.40; O, 35.92 |
|
|
|
Когда с N-конца снимается защита, нингидриновый тест показывает синий цвет. Аминокислотные остатки соединяются с пептидной цепью, будучи защищенными на N--конце. Поэтому, если следующий аминокислотный остаток успешно присоединяется к пептидной цепи, нингидриновая проба даст бесцветный или желтый результат.
Нингидрин гидрат, также известный как гидрат дигидроинден-1,2,3-триона, с молекулярной формулой C9H6O4, представляет собой кристаллический порошок от белого до бледно-желтого цвета с уникальной трикарбонильной структурой. Высокоэлектрофильный центральный атом углерода в его молекуле делает его основным реагентом для обнаружения аминосодержащих соединений, широко используемых в таких областях, как биохимия, судебная медицина, клиническая диагностика, сельскохозяйственная наука и анализ материалов.
Механизм химической реакции и особенности развития цвета инденона
Цветная реакция инденона основана на его специфической реакции с соединениями, содержащими альфа-аминогруппы. В слабокислых условиях (рН 4-6) инданон вступает в трехстадийную реакцию с альфа-аминокислотами:
Реакция конденсации: дегидратационная конденсация аминогруппы - с инданоном с образованием основания Шиффа;
Изомеризация декарбоксилирования: основание Шиффа подвергается декарбоксилированию и изомеризации в имин, высвобождая одну молекулу CO₂;
Уменьшение окисления и развитие окраски: имин далее реагирует с инден-кетоном с образованием комплекса пурпурного цвета Ругемана от темно-синего до фиолетового с максимальной длиной волны поглощения 570 нм.
Особый случай: пролин и гидроксипролин имеют разные пути реакции из-за присутствия пирролидиновых колец, что приводит к образованию желтых продуктов; Аспарагиновая кислота реагирует с образованием коричневого вещества. Эта селективность делает инденкетон важным инструментом для анализа структуры аминокислот.
Приложения в биохимии и клинической диагностике
1. Количественный анализ аминокислот и белков.
Инденкетон является основным цветным реагентом для анализаторов аминокислот. После хроматографического разделения инденон реагирует с аминокислотами с образованием окрашенного комплекса, который количественно определяют колориметрически при длине волны 570 нм с использованием спектрофотометрии. Например:
Тестирование пищевых продуктов: определите содержание лизина в молоке и оцените пищевую ценность белка;
Клинический диагноз: Выявление нарушений обмена аминокислот в моче (например, фенилкетонурия);
Разработка лекарств: анализируйте чистоту пептидных препаратов, чтобы обеспечить согласованность партий.
Технические преимущества: Высокая чувствительность (предел обнаружения в молярном диапазоне Дана), широкий линейный диапазон (0,1-100 мкмоль/л), подходит для комплексного матричного анализа.
2. Мониторинг твердофазного пептидного синтеза (SPPS).
При твердофазном синтезе пептидов инденон контролируется в режиме реального времени-на этапах снятия защиты с помощью тестирования Кайзера. Обнаружение снятия защиты:
Когда N-концевая защитная группа (такая как Fmoc) пептидной цепи удаляется, реакция между свободной аминогруппой и инденоном становится синей, что указывает на завершение реакции;
Оценка эффективности связывания: если следующая аминокислота успешно связывается, N-концевая аминогруппа защищена, а тест на инданон показывает бесцветность или желтый цвет, условия синтеза можно соответствующим образом оптимизировать.
Случай: Во время синтеза ангиотензина II (Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Phe) тестирование Кайзера подтвердило, что эффективность связывания на каждом этапе превышала 99%, а чистота конечного продукта достигала 98,5%.
3. Анализ продуктов гидролиза белков.
Инденкетон может обнаруживать свободные аминокислоты в гидролизате белка и способствовать изучению механизмов ферментативного гидролиза. Например:
Ферментативный гидролиз казеина желудочной протеазой: количественно оценить высвобождение фенилаланина и лейцина с помощью колориметрического метода с нингидрином для оценки активности фермента;
Мониторинг микробной ферментации: анализируйте аминокислотный профиль в дрожжевом ферментационном бульоне и оптимизируйте процесс ферментации.
Применение судебной экспертизы и уголовного расследования
1. Развитие скрытых отпечатков пальцев
Инденкетон является «золотым стандартом» реагента для судебно-медицинской экспертизы отпечатков пальцев. Пот в отпечатках пальцев содержит аминокислоты (такие как лизин и серин), которые реагируют с нингидрином, образуя пурпурный комплекс. Эффект визуализации лучше, чем при традиционном окуривании йодом.
Процесс работы:
Распылите 0,2% раствор нингидрина в этаноле на поверхность образца;
Нагревание при 60 градусах в течение 10 минут ускоряет реакцию;
Фиолетовые линии отпечатков пальцев хорошо видны и могут храниться в течение нескольких месяцев.
Случай: В 2023 году полиция успешно раскрыла дело о краже со взломом, извлекив отпечатки пальцев подозреваемого с дверной ручки с помощью технологии визуализации нингидрина.
2. Идентификация активности яиц шистосомы
Яйца шистосом содержат сукцинатдегидрогеназу, которая обладает высокой активностью и может катализировать восстановление инденона с образованием продуктов пурпурного цвета; Мертвые яйца не обладают ферментативной активностью и имеют желтый цвет. Этот метод используют для оценки терапевтического эффекта шистосомоза:
До обработки: цветопередача живых яиц более 80%;
Если после обработки цветопередача живых яиц составляет менее 10%, это свидетельствует о том, что препарат эффективен.
Приложения в области сельскохозяйственной науки
1. Исследования по использованию почвенных микробных источников углерода.
Инденкетон может отслеживать поглощение меченых субстратов микроорганизмами. Например:
Добавьте в почву мочевину, меченную ¹ ³ C;
Экстрагируйте микробные белки и высвобождайте карбоксильный углерод с помощью нингидрина;
Определите количественную долю углерода мочевины, поступающего в микробную биомассу, измерив соотношение ¹ ³ C/¹ ² C с помощью изотопного масс-спектрометра.
Значение исследования: Выявить механизм фиксации углерода бактериями, окисляющими аммиак (такими как Nitrosomonas), и оптимизировать стратегию внесения азотных удобрений.
2. Анализ метаболизма аминокислот растений.
Инденкетон в сочетании с бумажной хроматографией (ПК) позволяет быстро анализировать аминокислотный состав в тканях растений. Например:
Извлечение свободных аминокислот из листьев риса;
Пятно на фильтровальной бумаге, используя в качестве проявляющего агента н-бутанол-уксусную кислоту (4:1:1);
Распылите раствор нингидрина, нагрейте для проявления цвета, рассчитайте значение Rf и определите тип аминокислоты.
Сценарий применения: Скрининг стрессоустойчивых сортов (например, солеустойчивого риса) и изучение роли аминокислот в реакции на стресс.
Приложения в материаловедении и промышленных испытаниях
1. Цветные реагенты для тонкослойной хроматографии (ТСХ).
Инденкетон — универсальный цветной реагент для ТСХ-детектирования аминных соединений.
Диапазон обнаружения: первичные амины, вторичные амины, аминокислоты, эфиры аминокислот;
Рекомендации по эксплуатации: после распыления цветного проявителя нагрейте его при температуре 105 градусов в течение 5 минут, и фиолетовые пятна станут отчетливо видны;
Чувствительность: Может обнаруживать аминные вещества нанограммового уровня.
Случай: При синтезе лекарств чистоту промежуточных продуктов контролируют с помощью метода нингидриновой ТСХ для обеспечения селективности реакции.
2. Определение содержания аминокислот на поверхности полимерных материалов.
Инденкетон может количественно анализировать свободные аминогруппы на поверхности полимеров, таких как хитозан и полилизин.
Погрузите материал в раствор инден-кетона, нагрейте, проведите реакцию и измерьте поглощение;
Рассчитайте содержание аминокислот с помощью стандартной кривой и оцените эффект модификации материала.
Значение исследования: Направлять функциональный дизайн биомедицинских материалов, таких как каркасы тканевой инженерии.
Метод синтезанингидрин гидрат, путь реакции следующий:
Шаг S1, в частности, включает в себя следующие операции: растворить дигидроинден-1,3-дикетон в этаноле, добавить раствор серной кислоты, капнуть раствор нитрита натрия, контролировать температуру реакции на уровне 15-20 градусов, проверить конечную точку реакции с помощью индикаторной бумаги с йодидом калия и крахмалом и получить мелкий порошок 2-нитрозо-1H-инден-1,3 (2H)-диона. Массовая доля раствора серной кислоты составляет 50-60%, массовая доля раствора нитрита натрия - 25-30%. Конечная точка реакции, проверенная с использованием тест-бумаги с йодидом-крахмалом, заключается в том, что тест-бумага с йодидом-крахмалом не окрашивается.
Шаг S2, в частности, включает следующие операции: 2-нитрозо-1H-инден-1,3(2H)-дион заменяют формальдегидом в присутствии соляной кислоты с получением инден-1,2,3-триона при 15-20 градусах. Массовая доля соляной кислоты составляет 25-30%, массовая доля формальдегида - 35-37%.
Шаг S3, в частности, включает в себя следующие операции: добавление триона 9-1,2,3 в экстракционный раствор, осаждение осадка и сушку осадка при пониженном давлении и температуре 50-60 градусов для получения восстановленного триона 9-1; Экстракционный раствор представляет собой раствор, состоящий из низкого содержания сульфита натрия и промышленного формальдегида (35–37 мас.%) в массовом соотношении 1:1.
Шаг S4, в частности, включает в себя следующие операции: окисление восстановленного нингидрина в растворе азотной кислоты при температуре 60–80 градусов для получения сырого нингидрина, перекристаллизация сырого нингидрина и воды в массовом соотношении 1:5, сушка полученного твердого вещества хлоридом кальция, сушка в вакууме при температуре 45–50 градусов для получения гидратированного нингидрина.
Характерная реакция:
Нингидрин — это реагент, используемый для обнаружения аммиака или первичных и вторичных аминов. При реакции с этими свободными аминами может быть получено темно-синее или фиолетовое вещество, называемое пурпуром Ругемана. Его часто используют для обнаружения отпечатков пальцев. Это связано с тем, что остатки лизина, содержащиеся в белках и пептидах, отслаиваются с поверхности отпечатка пальца, а первичный амин на них обнаруживается нингидрином. При комнатной температуре представляет собой белое твердое вещество, растворимое в этаноле и ацетоне. Нингидрин можно рассматривать как гидрат дигидроинден-1,2,3-тринона.
Реактивность:
Атом углерода карбонильной группы частично заряжен положительно. Если присоединенная к ней соседняя группа обладает способностью притягивать электроны (например, карбонильный радикал), положительный заряд карбонильного углерода еще больше усилится. Следовательно, центральный атом углерода 1,2,3-трихонильных соединений более электрофильен, чем простые кетоны. Следовательно, индан-1,2,3-трион легко вступает в реакцию с нуклеофилами, например с водой. Однако для большинства карбонильных соединений форма карбонила более стабильна, чем форма продуктов, связывающих воду. Причина, по которой нингидрин может образовывать стабильный гидрат центрального атома углерода, связана с дестабилизацией соседней карбонильной группы.
Следует отметить, что для получения хромофора нингидрина необходимо конденсировать амин с одной молекулойнингидрин гидратдля получения базы Шиффа. Эту стадию могут пройти только аммиак и первичный амин. Должны быть протоны, используемые для переноса основания Шиффа, поэтому, если углерод, соседний с амином, представляет собой третичный атом углерода, он не может быть обнаружен продуктом. Реакция нингидрина со вторичным амином приводит к образованию соли имина ([R1R2C=NR3R4]+), причем соль имина также имеет цвет, обычно оранжевый.
Часто задаваемые вопросы
Что такое гидрат нингидрина?
Нингидрин является представителем класса инданонов, который представляет собой индан-1,3-дион, несущий два дополнительных гидроксильных заместителя в положении 2. Он играет роль цветового индикатора и метаболита человека. Это член инданонов, кетонгидрата, бета-дикетона и ароматического кетона.2,2-Дигидрокси-1H-инден-1,3-(2H)-дион.
горячая этикетка : нингидрин гидрат cas 485-47-2, поставщики, производители, завод, опт, купить, цена, оптом, продажа