Буфер BIS-TRIS CAS 6976-37-0

Это эффективный биологический буфер с эффективным диапазоном буферизации pH 5,8-7,2 и значением pKa 6,5 ​​(25 градусов). В биохимических экспериментах многие биомолекулы, такие как белки и нуклеиновые кислоты, очень чувствительны к значениям pH, и даже небольшие изменения pH могут повлиять на их структуру и функцию. BIS-TRIS может стабилизировать значение pH раствора в этом диапазоне pH, обеспечивая стабильную среду для биохимических реакций. В процессе разделения и очистки белка можно поддерживать естественную конформацию белка, чтобы предотвратить денатурацию или осаждение из-за изменений pH.

Например, в методах очистки белков, таких как ионообменная хроматография и аффинная хроматография, использованиеБуфер BIS-TRISможет гарантировать, что взаимодействие между белками и хроматографической средой происходит в условиях стабильного pH, тем самым повышая эффективность и чистоту очистки.

В анализах активности ферментов активность ферментов часто зависит от конкретного pH среды. Значение pH реакционной системы можно точно контролировать, чтобы позволить ферменту проявлять каталитическую активность при оптимальных условиях pH, тем самым точно измеряя активность фермента. Это имеет большое значение для изучения свойств, механизмов действия и разработки ферментных препаратов ферментов.

БИС-ТРИС обладает способностью координироваться с различными ионами металлов и образовывать стабильные комплексы, такие как Zn² ⁺ - БИС-ТРИС, Mn ² ⁺ - БИС-ТРИС и др. Эти комплексы с ионами металлов играют важную роль в изучении структуры и функций биомолекул. В структурном анализе белков ионы металлов часто выступают в качестве кофакторов для участия в образовании активных центров в белках. Координируя BIS-TRIS с ионами металлов, можно стабилизировать структуру белковых комплексов ионов металлов, что упрощает использование таких методов, как рентгеновская кристаллография и ядерный магнитный резонанс (ЯМР) для структурного анализа.

Например, активные центры некоторых цинксодержащих ферментов требуют ионов цинка для поддержания своей каталитической активности, а комплексы BIS-TRIS Zn ² ⁺ могут обеспечивать стабильную структурную среду для этих ферментов, что помогает точно анализировать их трехмерные структуры.

В исследованиях нуклеиновых кислот, таких как секвенирование ДНК, ионы металлов также могут участвовать в сворачивании и функциональной регуляции нуклеиновых кислот. Координация между BIS-TRIS и ионами металлов может регулировать местное окружение нуклеиновых кислот, влияя на взаимодействия между нуклеиновыми кислотами и белками, малыми молекулами и т. д., предоставляя мощный инструмент для углубленных-исследований структуры и функций нуклеиновых кислот.

BIS-TRIS имеет важное применение в экспериментах по электрофорезу белков. SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия) и нативный PAGE (электрофорез в неденатурирующем полиакриламидном геле) являются распространенными методами электрофореза белков.Буфер BIS-TRISчасто используется для приготовления буфера для электрофореза для поддержания стабильности pH раствора во время электрофореза. В SDS-PAGE белки денатурируются и отрицательно заряжаются в буфере для образцов, содержащем SDS и меркаптоэтанол, а затем разделяются по размеру молекул в полиакриламидном геле.

Он может обеспечить стабильность значения pH буфера для электрофореза, позволяя белкам мигрировать ожидаемым образом в электрическом поле, тем самым точно разделяя белки с разной молекулярной массой и определяя их относительную молекулярную массу.

В Native PAGE белки сохраняют свою естественную конформацию для электрофоретического разделения. Его использование может предотвратить денатурацию белков из-за изменений pH, сохранить естественную активность и конформационную информацию белков, а также помочь изучить естественное состояние и взаимодействие белков.

Вестерн-блоттинг — важный экспериментальный метод, используемый для определения уровня экспрессии целевых белков. Пропановый буфер Bis Tris часто используется в качестве буфера для транспорта белков в экспериментах по иммуноблоттингу.

Во время переноса белка из геля на мембрану пропановый буфер Bis Tris может поддерживать стабильный pH среды, гарантируя, что белок переносится на мембрану с правильной конформацией и зарядовым состоянием. Это имеет решающее значение для последующего связывания антител и обнаружения сигнала.

Если белки претерпевают денатурацию или конформационные изменения в процессе переноса, это может привести к тому, что антитела не смогут точно распознать целевой белок, что повлияет на точность экспериментальных результатов. Таким образом, пропановый буфер Bis Tris играет решающую роль в экспериментах по иммуноблоттингу, помогая повысить чувствительность и надежность экспериментов.

Культура клеток является важной технологией в биомедицинских исследованиях, а значение pH среды для культивирования клеток оказывает значительное влияние на рост и метаболизм клеток. Пропановый буфер BIS-TRIS можно использовать для приготовления сред для культивирования клеток для поддержания стабильного значения pH во время процесса культивирования клеток.

Различные типы клеток имеют разные требования к pH, но обычно требуют роста в среде, близкой к физиологическому pH (приблизительно 7,2–7,4).

Пропановый буфер BIS-TRIS может смягчать изменения pH культуральной среды во время культивирования клеток, предотвращать колебания pH, вызванные накоплением продуктов метаболизма, газообменом и другими факторами, а также обеспечивать стабильную среду для роста клеток. Это имеет большое значение для нормального роста, пролиферации и функциональной экспрессии клеток, помогая повысить успешность культивирования клеток и надежность экспериментальных результатов.

Электрофорез нуклеиновых кислот является широко используемым методом определения длины и концентрации нуклеиновых кислот-мишеней, включая электрофорез ДНК и РНК. Подходит для экспериментов по электрофорезу нуклеиновых кислот, он может поддерживать стабильность pH буфера для электрофореза.

При электрофорезе нуклеиновых кислот молекулы нуклеиновых кислот мигрируют под действием электрического поля в зависимости от их размера и зарядовых свойств.

Он может обеспечить стабильность значения pH раствора во время электрофореза, позволяя молекулам нуклеиновых кислот мигрировать ожидаемым образом, тем самым точно разделяя фрагменты нуклеиновых кислот разной длины и определяя их концентрации. Это имеет большое значение для таких исследований, как клонирование генов, анализ экспрессии генов и секвенирование нуклеиновых кислот.

BIS-TRIS также можно использовать для обнаружения креатинкиназы. Креатинкиназа — важный фермент, который играет решающую роль в энергетическом обмене мышц. Определение его активности имеет большое значение для диагностики мышечных заболеваний и оценки спортивных травм. В эксперименте по обнаружению креатинкиназы можно поддерживать стабильность pH реакционной системы, чтобы гарантировать, что фермент проявляет каталитическую активность при оптимальных условиях pH. Точно контролируя значение pH, можно повысить точность и надежность измерения активности креатинкиназы, что обеспечивает надежную поддержку клинической диагностики и исследований.

BIS-TRIS также играет важную роль в исследовании и применении гемоглобина. В процессе разделения гемоглобина можно поддерживать его стабильность и активность, чтобы предотвратить денатурацию или агрегацию из-за изменений pH. Это имеет большое значение для очистки и структурных исследований гемоглобина.

BIS-TRIS может эффективно защитить гемоглобин во время процесса сублимационной-сушки. Сублимационная сушка — широко используемый метод сохранения биологических продуктов, но белки могут быть повреждены в процессе замораживания и сушки. Он может обеспечить стабильную среду для гемоглобина во время процесса сублимационной-сушки, уменьшить денатурацию и инактивацию белка, а также улучшить активность и стабильность гемоглобина после сублимационной-сушки.

ИЭФ (изоэлектрофокусирующий электрофорез) и 2-D-гель-электрофорез являются распространенными методами в протеомных исследованиях, которые используются для разделения и анализа сложных смесей белков. BIS-TRIS можно использовать в качестве катодного электролита для гель-электрофореза IEF/2-D.

Во время процесса IEF белки мигрируют и фокусируются в градиенте pH в зависимости от их изоэлектрической точки. Католит BIS-TRIS может поддерживать стабильность pH буфера для электрофореза, гарантируя, что белки могут точно мигрировать к своей изоэлектрической точке во время процесса изоэлектрической фокусировки. При двумерном гель-электрофорезе используютБуфер BIS-TRISтакже помогает улучшить эффект разделения и разрешение белков, предоставляя высококачественные-данные для протеомных исследований.