4-Метилумбеллиферил-бета-D-глюкуронид CAS 6160-80-1

4-Метилумбеллиферил-бета-D-глюкуронид(4-MUG) представляет собой органическое соединение с молекулярной формулой C16H13NO7 и молярной массой 333,27 г/моль для CAS 6160-80-1. Обычно он выглядит как порошок или кристалл от белого до светло-желтого цвета. Он имеет хорошую растворимость в воде и может растворяться в воде. Молекулярная структура этого соединения содержит группу глюкуроновой кислоты (GlcA) и группу 4-метилумбеллиферона (4-MeUmb). Группа глюкуроновой кислоты соединена с группой 4-метилумбеллиферона гликозидными связями. Характерные спектральные свойства. Например, в ультрафиолетовом свете соединение проявляет сильную флуоресценцию и может быть использовано для его количественного анализа. Его максимальная длина волны возбуждения и максимальная длина волны излучения составляют 365 нм и 448 нм соответственно. Это слабая кислота с более низким значением pKa в воде. Как субстрат с флуоресцентными свойствами он имеет широкое применение при обнаружении и скрининге активности ферментов. Его простой принцип, удобное управление, высокая чувствительность и возможность количественной оценки делают его важным инструментом во многих областях, таких как биомедицинские, химические и биологические науки.

4-Метилумбеллиферил-бета-D-глюкуронид(4-MUG) — это флуоресцентный субстрат, широко используемый для обнаружения и скрининга активности ферментов.

1. Обнаружение активности ферментов

Принцип: определение ферментативной активности 4-MUG основано на его характеристике гидролиза специфическими ферментами в качестве субстрата. Когда фермент действует на 4-MUG, он расщепляет его гликозидные связи, высвобождая 4-метилумбеллиферон (4-MU) с флуоресцентными свойствами. Обнаружив интенсивность и изменения сигналов флуоресценции, можно оценить активность ферментов.

Область применения:

(1) Анализ биологических образцов: используя 4-MUG в качестве субстрата, можно обнаружить активность специфических ферментов в биологических образцах (таких как кровь, моча, гомогенат тканей и т. д.). Это имеет большое значение для диагностики заболеваний, исследования метаболизма лекарств и открытия биомаркеров.

(2) Скрининг ингибиторов ферментов: при совместной инкубации 4-MUG с ингибиторами ферментов можно наблюдать влияние ингибиторов ферментов на активность ферментов. Этот метод можно использовать для скрининга и оценки эффективности ингибиторов ферментов, обеспечивая руководство для проектирования и разработки лекарств.

(3) Исследование кинетики ферментов: используя различные концентрации 4-MUG в качестве субстратов, можно изучить кинетические параметры фермента, такие как константа Михаэлиса (Km) и максимальная скорость реакции (Vmax). Эти данные помогают понять механизм и эффективность реакций, катализируемых ферментами.

2. Скрининг активности ферментов.

(1) Высокопроизводительный скрининг: 4-MUG подходит для высокопроизводительного скрининга активности ферментов, поскольку он обладает флуоресцентными свойствами и позволяет обеспечить быстрое и чувствительное обнаружение. Совместно инкубируя большое количество соединений-кандидатов с 4-MUG, можно провести скрининг соединений, регулирующих активность ферментов.

(2) Скрининг ингибиторов ферментов: используя 4-MUG в качестве субстрата, можно проверять соединения, обладающие ингибирующим действием на ферменты. Этот метод можно использовать для открытия новых ингибиторов ферментов и предоставления молекул-кандидатов для проектирования и разработки лекарств.

(3) Скрининг активаторов ферментов. Помимо ингибиторов ферментов, 4-MUG также можно использовать для скрининга соединений, обладающих эффектом активации ферментов. Обнаружив усиление сигналов флуоресценции, можно идентифицировать соединения, которые могут усиливать активность ферментов, открывая новые пути регуляции функции ферментов.

3. Биофлуоресцентная маркировка: 4-Метиллумбеллиферол-бета-D-глюкуронид обладает флуоресцентными свойствами и часто используется в качестве биофлуоресцентного маркера. Он может излучать яркую синюю флуоресценцию при возбуждении ультрафиолетовым светом, причем спектр излучения значительно перекрывается со спектром возбуждения, что полезно для обнаружения и анализа флуоресценции. Флуоресцентные зонды могут быть изготовлены путем связывания 4-Метиллумбеллиферола-бета-D-глюкуронида с антителами, белками или другими биомолекулами, которые можно использовать для чувствительного обнаружения и локализации молекул-мишеней в биологических образцах.

4. Исследования метаболизма лекарств:4-Метилумбеллиферил-бета-D-глюкуронидчасто используется в качестве модельного соединения для исследований метаболизма лекарств. В исследованиях метаболизма лекарств это соединение может моделировать структуру природных метаболитов и служить моделью возможных промежуточных или конечных продуктов, которые могут образовываться в ходе метаболизма лекарств. Изучая и характеризуя метаболические процессы лекарств в организме, мы можем получить более глубокое понимание их метаболических путей, кинетики и биодоступности.

Лабораторный метод синтеза4-Метилумбеллиферил-бета-D-глюкуронидвключает в себя следующие шаги:

(1) Введение защитных групп: выберите подходящие защитные группы для защиты глюкуроновой кислоты и предотвращения ненужных побочных реакций в последующих реакциях. Общие защитные группы включают сложноэфирные группы, эфирные группы и т. д. Выберите метиловый эфир в качестве защитной группы для преобразования глюкуроновой кислоты в метиловый эфир глюкуроновой кислоты. В этой реакции в качестве реагентов используются метанол и ангидрид карбоновой кислоты, а в качестве катализатора — серная кислота.

Уравнение реакции выглядит следующим образом:

(CH₃)₂С(ОН)-СН₂-СООН + Н₂ТАК₄→ (СН₃)₂С(О)-СН₂-СООН + СН₃ОЙ

(2) Реакция сочетания: Реакция сочетания 4-метилумбеллиферона и глюкуроновой кислоты с защитными группами. Этот этап обычно требует использования связующих агентов, таких как DCC, EDC и т. д., для облегчения реакции. Условия реакции необходимо контролировать соответствующим образом, чтобы обеспечить чистоту и выход продукта. В этой реакции в качестве связующего агента используется DCC.

(3) Уравнение реакции имеет следующий вид:

(CH₃)₂С(О)-СН₂-СООН + NH₂-CH=CH-COOH + DCC + C₆H₅N₃О → (СН₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-COOH + H₂О + НХ₄ОЙ

(CH₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-COOH + NH₂(CH₃) → (СН₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + H₂O

(CH₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-CO-NH(CH₃) + HBr → (CH₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) + ХБр

(CH₃)₂С(О)-СН₂-CO-NH-CH=CH-CO-Br(CH₃) → (СН₃)₂С(О)-СН₂-СО[С₁₆H₈-(НХ^-)-6]-Br(CH₃) + NaCl + NaBr

(3) Удаление защитных групп. При использовании смеси метанола натрия и этанола натрия в качестве катализатора метиловый эфир метилглюкуроновой кислоты удаляется из 4-метиллумбеллиферил-бета-D-глюкуронида. Уравнение реакции выглядит следующим образом:

(CH₃)₂С(О)-СН₂-СО[С₁₆H₈-(НХ^-)-6]-Br(CH₃) + СН₃ОНа + С₂H₅ОНа → (CH₃)₂С(О)-СН₂-СО[С₁₆H₈-(НХ^-)-6] + 2NaBr + 2CH₃ОН + С₂H₅ОЙ

(4) Очистка: Сырой продукт очищают колоночной хроматографией и перекристаллизацией с получением 4-метиллумбеллиферол-бета-D-глюкуронида высокой чистоты. Конкретный процесс заключается в следующем:

Растворите сырой продукт в соответствующем количестве растворителя и отделите его колоночной хроматографией. Подбирайте подходящие адсорбенты и элюенты, последовательно смывайте примеси и непрореагировавшее сырье до получения чистых продуктов. Рекристаллизация — это процесс растворения чистых продуктов в соответствующем количестве растворителя и получения чистых продуктов путем охлаждения и кристаллизации. Перекристаллизация позволяет удалить небольшое количество непрореагировавшего сырья и побочных продуктов, что еще больше повышает чистоту продукта.

горячая этикетка : 4-метилумбеллиферил-бета-d-глюкуронид cas 6160-80-1, поставщики, производители, завод, оптовая торговля, купить, цена, оптом, продажа