Тетраметилбензидин CAS 54827-17-7

В области клинической диагностики in vitro ТМБ является основным хромогенным субстратом иммуноферментного анализа (ИФА) и основным функциональным компонентом подавляющего большинства наборов для иммуноанализа. В сфере серологического выявления инфекционных заболеваний наборы ELISA для скрининга инфекционных заболеваний, таких как гепатит BB, антитела к гепатиту C и антитела к СПИДу, на основе хромогенной системы TMB, с чрезвычайно низким фоновым цветом и высокой чувствительностью обнаружения, стали основной технической схемой для крупномасштабного скрининга крови на домашних станциях крови.

Данные применения отечественных станций крови показывают, что минимальный предел обнаружения поверхностного антигена гепатита BB может достигать 0,1 МЕ/мл при использовании набора для скрининга крови с использованием ТМБ в качестве хромогенного субстрата.

По сравнению с традиционной хромогенной системой OPD уровень ложноотрицательных пропущенных диагнозов снижается на 90%, что полностью блокирует риск передачи инфекционных заболеваний, связанных с переливанием крови, от источника. При рутинном амбулаторном скрининге на инфекционные заболевания в больницах третичного уровня набор колориметрической системы ELISA TMB контролирует разницу результатов обнаружения между партиями в пределах 5 %, удваивает скорость обнаружения по сравнению с традиционными методами и может выполнять высокопроизводительное-тестирование тысяч образцов в день.

Идеально отвечает потребностям раннего скрининга инфекционных заболеваний в больших-популяциях. При клиническом обнаружении гормонов и опухолевых маркеров подчеркивается преимущество высокой чувствительности колориметрической системы TMB. При обнаружении показателей гормонов функции щитовидной железы, таких как ТТГ, Т3, Т4 и т. д., динамический линейный диапазон развития цвета ТМБ в три раза шире, чем у традиционных реагентов для проявления цвета, которые могут точно охватывать полный диапазон концентраций от здоровых людей до пациентов с гипертиреозом и гипотиреозом, избегая ложных тревог, вызванных эффектом крючка в образцах с высокой концентрацией.

При клиническом обнаружении опухолевых маркеров набор ИФА на основе ТМБ может точно обнаруживать опухолевые маркеры, такие как СЕА и АФП, с концентрацией всего несколько нг/мл в сыворотке, обеспечивая надежные количественные результаты для раннего скрининга и послеоперационного мониторинга рецидивов рака.

Статистические данные отделения патологии третичной больницы в Китае показывают, что уровень обнаружения ранних опухолей желудочно-кишечного тракта с использованием схемы обнаружения колориметрической комбинации опухолевых маркеров TMB на 25% выше, чем традиционные методы. В сценарии вспомогательной диагностики быстрого обнаружения антигена COVID-19, ТМВ, как основного компонента ферментативного развития цвета, отличного от метода коллоидного золота.

Он применяется в высокопроизводительной системе ИФА для обнаружения антигена COVID-19. Чувствительность обнаружения на порядок выше, чем у традиционного метода коллоидного золота, что позволяет добиться положительного обнаружения на стадии низкой вирусной нагрузки, что значительно снижает процент пропущенных диагнозов среди лиц, инфицированных на ранней стадии. В вспомогательной системе полностью автоматизированного хемилюминесцентного иммуноанализа ТМБ, как улучшенный субстрат для прямой хемилюминесценции пероксидазы хрена (HRP), может значительно улучшить интенсивность и стабильность люминесцентного сигнала, увеличить соотношение сигнал-/-шум хемилюминесцентного обнаружения в 4 раза и контролировать значение CV результата обнаружения в пределах 3 %, полностью удовлетворяя требованиям высокой-точности обнаружения высококлассных полностью автоматизированных систем. иммунологическое оборудование.

В области биологических исследований,тетраметилбензидинявляется предпочтительным хромогенным субстратом для вторичных антител, меченных HRP, в экспериментах по вестерн-блоттингу и является одним из наиболее часто используемых хромогенных реагентов в лабораториях молекулярной биологии. В традиционных экспериментах по вестерн-блоттингу использование колориметрической системы с усилением хемилюминесценции TMB может обнаруживать целевые белки даже на уровне пг.

По сравнению с традиционным колориметрическим методом DAB чувствительность обнаружения увеличивается на два порядка, и он может легко идентифицировать изменения экспрессии белков сигнального пути с низким содержанием и факторов транскрипции в клетках. Сравнительные экспериментальные данные биологической лаборатории отечественного университета показывают, что при использовании оптимизированного высокочувствительного люминесцентного раствора ТМБ время проявления вестерн-блоттинга было сокращено с традиционных 30 минут до менее 10 секунд с чистыми фоновыми полосами и отсутствием примесей. Можно четко различить две схожие белковые полосы с разницей молекулярной массы всего в 1 кДа, что значительно повышает надежность экспериментов по иммуноблоттингу белков.

В экспериментальных сценариях иммуногистохимии и иммуногистохимии улучшенная система окрашивания TMB может генерировать стабильные нерастворимые продукты синего цвета, точно определять положения экспрессии целевых белков в срезах тканей и клеточных слайдах. По сравнению с традиционным окрашиванием DAB на коричневато-желтый цвет, продукты окрашивания синим TMB образуют мягкое цветовое различие с сине-фиолетовыми ядрами, окрашенными гематоксилином, без общей краевой диффузии и фоновых неспецифических проблем окрашивания, присущих окрашиванию DAB. В экспериментах по локализации белка-нейромедиатора в нервной ткани и интерпретации экспрессии белка PD-L1 в опухолевой ткани.

Распознавание результатов окрашивания ТМВ значительно лучше, чем традиционные методы окрашивания, что помогает исследователям более точно наблюдать морфологию субклеточной локализации белков.

В базовом исследовательском сценарии анализа ферментативной активности ТМВ является специфическим субстратом для определения следов активности пероксидазы. На основе колориметрической спектрофотометрии окисления ТМБ можно точно определить активность фермента HRP при концентрации всего 1 нг/мл в образце. Это классический экспериментальный метод изучения активности пероксидазы растений и микробных антиоксидантных ферментов. В передовых исследованиях в области энзимологии одиночных молекул иммобилизованные молекулы ТМБ могут генерировать локализованные цветные преципитаты под катализом одной молекулы фермента HRP.

Пространственное распределение и каталитическую кинетику отдельной молекулы фермента можно наблюдать непосредственно с помощью оптического микроскопа, что обеспечивает интуитивно понятный метод наблюдения для фундаментальных исследований в области энзимологии одиночных-молекул. В сценарии обнаружения гибридизации нуклеиновых кислот HRP метят на зонде нуклеиновой кислоты, и последовательность целевой нуклеиновой кислоты в образце количественно выявляется по интенсивности цвета TMB. Без необходимости использования сложного флуоресцентного оборудования для обнаружения можно выполнить недорогое-качественное и количественное обнаружение нуклеиновых кислот. Он широко использовался в экспериментах по генному типированию и скринингу генетически модифицированных компонентов в массовых научно-исследовательских лабораториях.

В области экологического мониторингатетраметилбензидиншироко используется в качестве высокочувствительного окислительного колориметрического реагента для быстрого обнаружения следовых количеств перекиси водорода и ионов тяжелых металлов в воде. В сценарии тестирования безопасности питьевой воды система колориметрического обнаружения с моделированием пероксидазы на основе TMB может быстро обнаружить остаточное дезинфицирующее средство перекиси водорода в питьевой воде при концентрации всего 0,01 мг / л, что намного ниже предельных требований национальных стандартов гигиены питьевой воды.

Процесс обнаружения не требует больших инструментов, а полуколичественную оценку можно выполнить, наблюдая глубину синего цвета раствора невооруженным глазом, что очень удобно для экстренного мониторинга качества воды в полевых условиях. В сценарии обнаружения ионов тяжелых металлов, таких как свинец и ртуть, в водоемах функционализированная пероксидаза, имитирующая нанозолото, может специфически реагировать на ионы тяжелых металлов. Благодаря изменению интенсивности цвета ТМБ можно достичь высокой селективной визуализации обнаружения ионов тяжелых металлов с пределом обнаружения до 1 нМ и стоимостью обнаружения всего в один процент от традиционной атомно-абсорбционной спектроскопии.

Он показал чрезвычайно высокую ценность при проверке безопасности питьевой воды в сельской местности и быстром мониторинге мест сброса промышленных сточных вод.

В области тестирования безопасности пищевых продуктов ТМВ является основным цветообразующим компонентом различных тест-полосок для быстрого обнаружения. В сценарии ингибирования ферментов при обнаружении остатков пестицидов в пищевых продуктах фосфорорганические и карбаматные пестициды ингибируют активность ацетилхолинэстеразы. Благодаря сочетанию изменения цвета ТМБ, катализируемого пероксидазой, проверка остатков пестицидов в овощах на- месте может быть быстро завершена в течение 10 минут.

Чувствительность обнаружения соответствует предельным требованиям национальных стандартов безопасности пищевых продуктов и является наиболее часто используемым методом быстрого обнаружения остатков пестицидов на внутренних сельскохозяйственных рынках и в местных регулирующих органах. При иммунохроматографическом обнаружении низкомолекулярных загрязнителей с коллоидным золотом, таких как кленбутерол и меламин, незаконно добавленных в пищу, ферментная катализированная усовершенствованная колориметрическая технология, основанная на ТМВ, может повысить чувствительность обнаружения традиционных тест-полосок с коллоидным золотом более чем в 10 раз, обеспечивая точное обнаружение незаконных добавок в низкой концентрации и значительно снижая вероятность ложноотрицательных результатов и пропущенных обнаружений.

В сценарии быстрого обнаружения микробного заражения в пищевых продуктах использование перекиси водорода, образующейся в ходе микробного метаболизма, в сочетании с цветной реакцией ТМВ позволяет быстро завершить полуколичественный скрининг общего количества бактерий в пищевых продуктах в течение 2 часов. По сравнению с традиционным 48-часовым методом культивирования на чашках время обнаружения значительно сокращается, что очень подходит для быстрого контроля качества линий по производству пищевых продуктов на предприятиях пищевой промышленности. При быстром обнаружении афлатоксина B1 в зерновых и масличных продуктах система обнаружения ELISA на основе TMB имеет минимальный предел обнаружения 0,1 мкг/кг, что полностью соответствует строгим предельным требованиям к содержанию афлатоксина в национальных продуктах питания. Стоимость обнаружения намного ниже, чем у методов масс-спектрометрического обнаружения с использованием больших инструментов, что делает его пригодным для крупномасштабных-исследований безопасности пищевых продуктов, связанных с зерном и маслом.