Порошок йодида пропидия, темно-красный кристалл с чистотой не менее 95% по данным ВЭЖХ, растворимый в воде, является широко используемым ядерным флуоресцентным агентом. Как аналог бромистого этидия, он может встраиваться между основаниями для достижения связывания с ДНК. Стабильное при комнатной температуре и давлении, это ароматическое соединение с небольшой молекулой. Его можно использовать для обнаружения апоптоза клеток, анализа клеточного цикла и исследования активности бактерий. Но в большинстве случаев его применение ограничивается фиксированными или инфильтрированными клетками. Если встречаются живые клетки, они будут активно уничтожаться живыми клетками, поэтому для процессов проникновения и фиксации обычно выбирают спиртовые или альдегидные реагенты. Альдегиды и спирты часто несовместимы с флуоресцентными белками и некоторыми поверхностными маркерами, поэтому более подходящим выбором может быть бензальдегид.
|
Химическая формула |
C27H34I2N4 |
|
Точная масса |
668.09 |
|
Молекулярный вес |
668.41 |
|
m/z |
668.09 (100.0%), 669.09 (29.2%), 670.09 (4.1%), 669.08 (1.5%) |
|
Элементный анализ |
C, 48.52; H, 5.13; I, 37.97; N, 8.38 |
|
|
|
Хранение и растворимость
|
хранилище |
|
|
|
Информация о растворимости |
H2O: 5 мг/мл (7,48 мМ). Рекомендуется обработка ультразвуком и нагревание до 60 градусов. ДМСО: 6,68 мг/мл (10 мМ), рекомендуется обработка ультразвуком. |
1. Обнаружение апоптоза и некроза клеток.
(1) Он может свободно проникать через мембраны мертвых или поврежденных клеток, связываться с ДНК и излучать красную флуоресценцию, которая используется для идентификации и количественного определения мертвых и некротических клеток.
(2) В проточной цитометрии его обычно используют для различения живых клеток, апоптотических и некротических клеток.
2. Анализ клеточного цикла
(1) После прочного связывания с ДНК интенсивность его флуоресценции пропорциональна содержанию ДНК.
(2) Измеряя содержание ДНК в клетках с помощью проточной цитометрии, можно выполнить анализ клеточного цикла, включая различие между фазой G0/G1, фазой S и фазой G2/M.
3. Окрашивание ядер клеток
(1) Обычно используется для флуоресцентного окрашивания ядер клеток, особенно в гистологических, цитологических и патологических исследованиях.
(2) Его можно использовать для наблюдения за морфологией, размером и количеством ядер клеток.
4.Исследование активности бактерий.
(1) Иногда его используют для исследования активности бактерий, но следует обратить внимание на влияние внеклеточных нуклеиновых кислот (eNA).
(2) В некоторых случаях его также можно использовать в сочетании с другими красителями для более точной оценки бактериальной активности.
5. Индикация целостности клеточной мембраны при проточной цитометрии.
(1) Он не может проникать в нормальные живые клетки, но может проникать через мертвые или поврежденные клеточные мембраны.
(2) Поэтому в проточной цитометрии его часто используют в качестве индикатора целостности клеточной мембраны.
6.Другие приложения
(1) Его также можно использовать для окрашивания ядер в таких исследованиях, как гибридизация in situ и иммуногистохимия.
(2) В некоторых случаях его также можно использовать для обнаружения изменений проницаемости клеточных мембран.
Другое использованиеПорошок йодида пропидияв клеточных экспериментах включают:
Тестирование жизнеспособности клеток:
Его обычно используют для определения жизнеспособности клеток, поскольку он не может проникать через клеточную мембрану живых клеток, но может проникать через клеточную мембрану поврежденных или мертвых клеток, связываться с клеточными нуклеиновыми кислотами и излучать красную флуоресценцию, чтобы различать живые и мертвые клетки.
01
Безопасность:
По сравнению с некоторыми другими флуоресцентными красителями, такими как ЭБ (бромид этидия), он относительно безопаснее, поскольку ЭБ является известным сильным канцерогенным мутагеном.
02
Исследования клеточного апоптоза:
Часто используется в сочетании с другими красителями, такими как аннексин V, для обнаружения различных стадий клеточного апоптоза. Аннексин V в сочетании с FITC может метить ранние апоптотические клетки, а также поздние апоптотические и некротические клетки.
03
Обнаружение фрагментации ДНК:
На поздней стадии клеточного апоптоза его можно использовать для обнаружения фрагментации ДНК, которая является характерным изменением клеточного апоптоза.
04
ТУНЕЛЬНЫЙ метод:
Его можно использовать в экспериментах TUNEL (мечение никелевых концов dUTP, опосредованное терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой) для обнаружения разрывов цепей ДНК во время апоптоза клеток.
05
Анализ клеточного цикла:
Может использоваться для анализа клеточного цикла в проточной цитометрии, определения различных стадий клеточного цикла путем измерения изменений в содержании ДНК.
06
Хромосомные и ДНК-маркеры:
Используется для маркировки хромосом или ДНК, наблюдения и анализа таких процессов, как репликация, транскрипция и репарация ДНК.
07
Маркировка органелл:
Его можно использовать для маркировки и визуализации органелл, таких как митохондрии и лизосомы, в клетках на определенных длинах волн.
08
Нейронаучные приложения:
Его используют в нейробиологии для маркировки нейронов и синапсов, наблюдения за передачей нервных сигналов и так далее.
09
Анализ экспрессии генов
Он может количественно анализировать уровень экспрессии генов и их распределение в клетках путем маркировки продуктов экспрессии генов.
10
1. Ограничение типа ячейки
Порошок йодида пропидияв основном подходит для фиксированных или инфильтрированных клеток. Из-за избирательной проницаемости живых клеток они активно выделяют йодид пропидия, поэтому для окрашивания живых клеток он обычно не пригоден.
2. Ограничения условий крашения
- Эффект окрашивания зависит от метода фиксации клеток и выбора пенетранта. Различные методы фиксации и пенетранты могут привести к разным эффектам окрашивания.
- Время и температура окрашивания также могут влиять на эффект окрашивания. Чрезмерное время окрашивания или высокая температура могут привести к повреждению структуры клеток, тем самым влияя на точность результатов окрашивания.
3. Ограничения безопасности
- Предполагается, что это канцероген, и длительное воздействие или вдыхание могут представлять опасность для здоровья человека. Поэтому при использовании йодида пропидия следует принимать соответствующие меры защиты, такие как ношение перчаток, масок и очков.
- Это также может вызвать раздражение кожи, глаз и дыхательной системы. При случайном контакте с веществом немедленно промойте большим количеством воды и как можно скорее обратитесь за медицинской помощью.
4. Ограничения совместимости с другими красителями.
В некоторых случаях могут возникнуть проблемы совместимости с другими красителями. Например, альдегидные и спиртовые реагенты часто несовместимы с флуоресцентными белками и некоторыми поверхностными маркерами, поэтому важно выбирать подходящие реагенты и условия при их использовании для окрашивания.
5. Ограничения экспериментального дизайна.
- При обнаружении апоптоза и некроза клеток его обычно используют в сочетании с другими красителями, такими как аннексин V-FITC, для различения разных типов клеток. Однако такое сочетание требует тщательного проектирования условий эксперимента для обеспечения точности и надежности результатов.
- При проведении анализа клеточного цикла интенсивность флуоресценции прямо пропорциональна содержанию ДНК. Однако на результаты анализа клеточного цикла могут влиять различные факторы, такие как синхронизация клеток, скорость пролиферации клеток и экспрессия факторов регуляции клеточного цикла. Поэтому при проведении анализа клеточного цикла необходимо комплексно учитывать эти факторы.
1. Проницаемость клеточной мембраны:
Порошок йодида пропидияне может проникнуть через неповрежденную клеточную мембрану, но может окрашивать клеточное ядро через клеточную мембрану мертвых клеток и клеток поздней стадии апоптоза. Эта характеристика делает его идеальным красителем для различения живых и мертвых клеток.
2. Повышение интенсивности флуоресценции:
После связывания с нуклеиновой кислотой интенсивность флуоресценции может увеличиваться в 20-30 раз, при этом максимальная длина волны возбуждения смещается в красную полосу примерно на 30-40 нм, а максимальная длина волны излучения смещается в синюю полосу на около 15 нм. Это делает его очень чувствительным при обнаружении.
3.Спектральные характеристики:
Его максимальная длина волны возбуждения/излучения составляет 535/617 нм, что обеспечивает хорошую дискриминацию при многоцветном флуоресцентном анализе, особенно при использовании в сочетании с другими флуоресцентными красителями.
4.Связывание с ДНК и РНК:
Он может связываться с РНК и требует обработки нуклеазой, чтобы отличить ДНК от окрашивания РНК.
Это обеспечивает удобство изучения РНК.
5.Совместимость:
Мы предлагаем различные компоненты трансмиссии, включая звездочки, роликовые цепи, шестерни, муфты, рейки, ступицы, шкивы, конические втулки, седла подшипников и многое другое.
6. Безопасность:
По сравнению с некоторыми другими флуоресцентными красителями, такими как ЭБ (бромид этидия), он относительно безопаснее, поскольку ЭБ является известным сильным канцерогенным мутагеном.
7. Широко используется:
Подходит для различных экспериментальных методов, таких как флуоресцентная микроскопия, конфокальная микроскопия, проточная цитометрия и анализ флуоресцентного анализатора.
8. Экологически чистый:
Его отходы могут быть переработаны напрямую, не вызывая загрязнения окружающей среды, что соответствует требованиям современных научных исследований по охране окружающей среды.
горячая этикетка : Порошок йодида пропидия касс 25535-16-4, поставщики, производители, завод, оптовая торговля, купить, цена, оптом, продажа